类器官培养操作步骤有哪些？

类器官制备的典型方法首先需要分离胚胎或多能干细胞，然后将它们培养在支持介质（如Matrigel等基质胶）上，以促使其三维生长。类器官中含有多种已分化的细胞类型，这些细胞类型在体内相应的器官中也存在。例如，Sato等人报道的小肠类器官模型中可以观察到小肠上皮的所有细胞类型^[3]。制导类器官形成的信号通路与体内器官发育和稳态维持的信号通路相同，因此，在培养基中需要添加细胞因子、生长因子和小分子，以激活或抑制参与类器官形成的特定信号通路。不同类型的类器官制备需要使用不同的添加物组合，即使是对于结构非常相似的组织，如小肠和结肠，其添加物组合也会有所不同^[4]。

在类器官的培养中，存在多种不同的方法，其中一些方法目前仍在初探阶段。下文将提供一些类器官培养的实例，并重点介绍细胞因子、生长因子和小分子在这些方法中的应用。

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