视网膜是眼睛中感受光线的神经区域,它起源于神经外胚层。眼睛是一个结构复杂的器官,由多种细胞以三维方式组成,而视网膜作为眼睛的一部分,其结构也相当复杂。视网膜发育初期形成两个相邻的上皮细胞层,分别是外侧的视网膜色素上皮层和内侧的神经视网膜层,最终形成包含光受体层和支持细胞层的组织。
视杯类器官可由人类胚胎干细胞(ESC)或小鼠ESCs来源制备。在视网膜分化过程中,将人胚胎干细胞(hESC)在含Y 27632的视网膜分化培养基中重新聚集,然后在培养的第2天至第18天期间添加Matrigel。为了形成视杯细胞,需要在培养的第15天至第18天期间向分化培养基中添加CHIR 99021(或重组Wnt3A)和重组人Sonic Hedgehog(Shh)。
这些人类视网膜类器官与小鼠的视网膜有许多相似的特征,但同时也具有人类视网膜的一些特点。其中一个显著特点是,人类视网膜类器官较大,发育需要更长的时间,并且可以形成含有视杆细胞和视锥细胞的多层组织,在小鼠ESC的培养中视锥细胞的分化非常罕见。