动物:
7周雌性SD大鼠,重量 147±12g。
建模:
Ⅱ型胶原诱导的关节炎(typeⅡ collagen-induced arthritis,CIA)模型是一种人类类风湿关节炎的常见病理模型。建立CIA大鼠模型的方法如下:10mg鸡Ⅱ型胶原溶解于5ml 0.1mol/L乙酸中混合均匀,溶液为2mg/ml。然后将溶液储存在4℃保存一晚上。第二天,用2ml注射器,抽取0.7ml胶原,再用另一支2ml注射器吸入0.7ml不完全弗氏液佐剂。在冰袋上,同时从两个注射器中取下针头,连接到三通上;关闭一个接口,允许两个注射器相通。使用注射器在冰袋上来回推30分钟,使两个注射器中的溶液充分混合成乳白色。如果生成的乳液无法分散在清水中时,1
mg/ml胶原乳液的制备可认为完成。在大鼠尾根,胶原乳剂(0.1ml)在2-3 cm的距离处皮下注射。在初次免疫后一周,将相同剂量的胶原乳液注射到这些大鼠身上相同的区域。
模型评估:
从第二次免疫当天开始,大鼠每隔一天进行临床检查以评估严重程度。模型大鼠足爪评分如下:0分没有宏观的红斑和肿胀的证据;1分红斑和轻度软组织肿胀局限于跗骨/踝关节;2分从踝关节到跗骨,红斑和轻度软组织肿胀; 3分红斑和中度软组织肿胀从踝关节延伸的到跗骨; 4分明显红斑和严重肿胀(包括踝关节、足底面和脚趾)或四肢强硬。