1. 体重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠,用5% 异氟醚深度麻醉小鼠,然后2.5% 异氟醚维持麻醉。
2. 在颈部中线切开一个切口。
3. 分离右侧的颈总动脉和迷走神经。
4. 右侧的颈总动脉暂时结扎。
5. 分离右侧的颈外动脉和颈内动脉,右侧的颈内动脉暂时结扎;右侧的颈外动脉头端结扎,近心端挂线备用。
6. 随后,用无菌的1ml注射器针头在右侧颈外动脉上做一个小洞,然后插入线栓,近心端挂线适度的系牢插入右侧颈外动脉的线栓,以防止血从小洞中流出;松开右侧颈内动脉暂时的结扎线,轻轻送入线栓到大脑中动脉,当感觉到阻力时停止,系牢线栓。
7. 缝合皮肤。
线栓法阻断大脑中动脉的方案
8. 60min后,线栓轻轻从大脑中动脉移出,系牢颈外动脉结扎线;然后松开右侧颈总动脉暂时的结扎线,小鼠进行再灌注。
9. 48h后神经功能评分,Garcia评分。
1).自发性活动;
2).四肢运动的对称性;
3).前爪伸展;
4).爬行;
5).身体本体感觉;
6).触须反应。