裸鼠成瘤实验

简要描述：裸鼠成瘤实验是肿瘤研究中常用的实验，常用免疫缺陷型小鼠来作为移植瘤模型的载体，通过对该小鼠的注射肿瘤细胞，使其成瘤，观察流体的生长来判断其生物学变化。

更新时间：2024-02-21 00:00:00
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裸鼠成瘤实验是肿瘤研究中常用的实验，常用免疫缺陷型小鼠来作为移植瘤模型的载体，通过对该小鼠的注射肿瘤细胞，使其成瘤，观察流体的生长来判断其生物学变化。

裸鼠成瘤实验过程：

1、细胞的状态是成瘤实验的关键，所以细胞生长状态一定要好，取处于对数生长期的细胞，细胞达80-90%左右密度为宜。收集细胞前一天晚上更换新鲜培养基。
2、胰酶消化细胞后用预冷的PBS洗两遍，目的为去除细胞中残余的血清。
3、用PBS或者无血清培养基吹打细胞沉淀至合适的浓度，一般皮下瘤接种的细胞量为1-5x10^6个细胞/支，接种体积为0.1-0.2ml ，因此细胞悬液的浓度为1-5x 10^7个细胞/ml，如若有条件的实验室，也可以加基质胶以加速瘤块的生成，基质胶与PBS或无血清的比列为1:1。
4、细胞消化后应尽快接种到裸鼠皮下，一般尽量在半小时内完成(如果接种量大，可以分批接种) ，途中将细胞悬液放在冰上降低细胞的代谢以保持细胞的活性。
5、选择的裸鼠一般在4-6周龄，体重16-18g左右，种植部位选择血供丰富区域，如腋窝中后部。
6、接种前用枪将细胞悬液充分的吹散，防止细胞成团而降低细胞成活率，导致小鼠接种细胞数量的差异过大。
7、接种时，针头在皮下进针深一点，约1cm深，针头在皮下左右滑动几次，以便细胞接种成团，减少注射后细胞悬液从针眼溢出。
8、接种后1-2周左右可以见到皮下开始出现肿块。
9、根据肿瘤细胞的特性和接种细胞的量，一般皮下成瘤的周期为1-2个月。肿瘤不宜生长过大，一般不要超过2000mm3。
10、肿瘤大小测量一般为1周两次，游标卡尺测量肿瘤最长和最短部位。V= 1/2*a*b2 (a为长轴，b为短轴)。

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